期刊简介

               本刊是由沈阳医学院主办的综合性医学学术期刊,主要刊载科研、教学以及临床医疗新成果、新技术、新经验和新进展,主要栏目有:专家论坛、基础医学与临床医学研究、预防医学、临床护理、技术方法、短篇与个案、论文摘要、综述与讲座及计算机应用等。欢迎校内外作者踊跃投稿。                

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  • 杂志名称:沈阳医学院学报杂志
  • 主管单位:沈阳市教育委员会
  • 主办单位:沈阳医学院
  • 国际刊号:1008-2344
  • 国内刊号:21-1393/R
  • 出版周期:季刊
期刊荣誉:执行《CAJ-CD规范》优秀期刊期刊收录:维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
沈阳医学院学报杂志2013年第04期

PPARγ基因RNA干扰慢病毒载体构建及干扰Leydig细胞株建立

马明月;张磊;张玉敏;裴秀丛;段志文

关键词:PPARγ, Leydig细胞, RNA干扰, 慢病毒, TM3
摘要:目的:通过靶向过氧化物酶体增殖因子活化受体PPARγ基因阻断,建立稳定干扰Leydig细胞株TM3.方法:采用慢病毒四质粒包装系统构建特异靶向小鼠PPARγ基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,用以建立PPARγ基因稳定沉默的Leydig细胞株TM3.结果:经测序证实,成功构建编码表达PPARγ短发夹结构RNA (sh-PPARγ)的慢病毒载体LV3-sh-PPARγ及对照载体LV3-Control.病毒载体转导Leydig细胞株TM3后,荧光显微镜证实细胞转染效率>90%,Real-time PCR测定实验组TM3细胞PPARγ的mRNA表达比未处理细胞下降70% (P <0.05),对照组与未处理细胞差异无显著性(P>0.05).Western blot显示实验组PPARγ蛋白表达量比未处理细胞明显下降(P<0.05),对照组与未处理细胞差异无显著性(P>0.05).结论:成功构建特异靶向小鼠PPARγ基因的RNAi慢病毒载体LV3-sh-PPARγ及对照载体LV3-Control,并成功建立PPARγ表达稳定干扰的小鼠Leydig细胞株TM3,为PPARγ生殖毒性研究提供了新的细胞模型.